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人apelin12(AP12)elisa試劑盒Ki檢測試劑盒Ki
- 英文名稱:AP12 elisa試劑盒Ki
- 品牌:越騰生物
- 產(chǎn)地:國產(chǎn)
- 型號:48T/96T
- 貨號:YT-H17621
- 價格: ¥1200/盒
- 發(fā)布日期: 2023-11-24
- 更新日期: 2025-07-23
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
保存條件 | 冷藏2-8°C |
品牌 | 越騰生物 |
貨號 | YT-H17621 |
用途 | 僅供科研使用,不得用于臨床診斷 |
檢測方法 | 雙抗體夾心法,間接法 |
保質(zhì)期 | 180天 |
適應(yīng)物種 | 人,大鼠,小鼠,猴,雞、羊等 |
檢測限 | 0.1 ng/ml |
數(shù)量 | 90 |
英文名稱 | AP12 elisa試劑盒Ki |
包裝規(guī)格 | 48T/96T |
標記物 | HRP標記 |
樣本 | |
應(yīng)用 | 科研實驗 |
是否進口 | 否 |
人apelin12(AP12)elisa試劑盒Ki檢測試劑盒Ki
貨號:YT-H17621
英文簡稱:AP12 elisa試劑盒Ki
定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中人apelin12(AP12)elisa試劑盒Ki檢測試劑盒Ki的濃度。
購買試劑盒,提供免費代測服務(wù)
操作程序:
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標準品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,0 值孔加樣本稀釋液 50μL,空白孔不加,樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外,標準品孔、0 值孔和樣本孔,加入辣根化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 20S,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù) 5 次。若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL,在酶標儀上讀取各孔吸光度(OD 值)。
產(chǎn)品特點
一、、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;。


其他用品
1、酶標儀(450nm)
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動洗板機
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml 量筒
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。樣本收集后,無法一次檢測完畢,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測。
5、細胞提取液:貼壁細胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞;懸浮細 胞可直接離心收集。收集的細胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
操作程序:
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標準品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,0 值孔加樣本稀釋液 50μL,空白孔不加,樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外,標準品孔、0 值孔和樣本孔,加入辣根化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 20S,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù) 5 次。若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL,在酶標儀上讀取各孔吸光度(OD 值)。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
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免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或小鼠體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負責(zé)。 2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。
貨號:YT-H17621
英文簡稱:AP12 elisa試劑盒Ki
定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中人apelin12(AP12)elisa試劑盒Ki檢測試劑盒Ki的濃度。
購買試劑盒,提供免費代測服務(wù)
操作程序:
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標準品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,0 值孔加樣本稀釋液 50μL,空白孔不加,樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外,標準品孔、0 值孔和樣本孔,加入辣根化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 20S,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù) 5 次。若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL,在酶標儀上讀取各孔吸光度(OD 值)。
產(chǎn)品特點
一、、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;。


其他用品
1、酶標儀(450nm)
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動洗板機
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml 量筒
樣品的采集和儲存
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清:4000rpm 條件下離心 20min,去除細胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,4000rpm 條件下離心 20min,小心地分離出血清,保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在 4000rpm 條件下,離心 20 分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。樣本收集后,無法一次檢測完畢,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
4、組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液,稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的 PBS(一般按 1: 9的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應(yīng) 9 mL的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液 5000×g 離心 5-10 分鐘,取上清檢測。
5、細胞提取液:貼壁細胞用冷的 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細胞;懸浮細 胞可直接離心收集。收集的細胞用冷的 PBS 洗滌 3 次。每 1×106 個細胞中加入 150-200μLPBS 重懸并通過反復(fù)凍融使細胞破碎(若含量很低可減少 PBS 的體積)。將提取液于 1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測。
6、其他生物體液:1000×g 離心 20 分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
操作程序:
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標準品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。設(shè)置標準品孔、0 值孔、空白孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,0 值孔加樣本稀釋液 50μL,空白孔不加,樣本孔加待測樣本 50μL。
3、除空白孔外,標準品孔、0 值孔和樣本孔,加入辣根化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL。
4、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 60min。
5、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 20S,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù) 5 次。若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡30s 的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
6、將底物 A 和 B 按 1:1 體積充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育 15min。
7、所有孔加入終止液 50μL,在酶標儀上讀取各孔吸光度(OD 值)。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
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