小鼠骨鈣素ELISA試劑盒的操作注意事項
發(fā)表時間:2025-01-07
小鼠骨鈣素ELISA試劑盒的操作注意事項主要包括以下幾點:
1、試劑準(zhǔn)備與保存:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出后,應(yīng)在室溫平衡一段時間(通常為15~30分鐘)后方可使用。未用完的板條應(yīng)裝入密封袋中保存,避免交叉污染。濃縮洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
2、加樣操作:各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如果標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。加樣時應(yīng)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,避免產(chǎn)生氣泡。
3、溫育與洗滌:嚴(yán)格按照說明書標(biāo)明的時間、溫度進行溫育操作。洗滌時,應(yīng)充分拍干孔內(nèi)液體,避免洗滌液殘留影響結(jié)果。洗板次數(shù)和洗滌方式也需按照說明書進行。
4、底物孵育與終止:底物孵育時需注意避光,孵育時間不宜過長或過短。加入終止液后,應(yīng)立即用酶標(biāo)儀在指定波長處測定各孔的吸光度(OD值)。
5、結(jié)果判定:以標(biāo)準(zhǔn)品濃度做為橫坐標(biāo),對應(yīng)的吸光度(OD值)作為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過樣本的OD值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找對應(yīng)的濃度值。如果樣本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測。
此外,還需注意試劑盒的有限期,不同批號組分不得混用,且僅供科研使用,不得用于臨床診斷。